HISTOLOGIA DE CALOS PROVENIENTES DA EMBRIOGÊNESE SOMÁTICA DE Coffea arabica L. – Embrapa Café

Abstract

O objetivo do presente trabalho foi comparar a anatomia dos calos primários tipo 1 (de crescimento não persistente) e tipo 2 (de crescimento persistente), e dos calos embriogênicos, oriundos de explantes foliares de Coffea arabica L., cultivar Catuaí Vermelho. Para tanto, os três tipos de calos foram fixados em FAA (formalina, ácido acético, álcool etílico), desidratados em série etanólica crescente, infiltrados em historresina e cortados em micrótomo rotativo. As secções foram coradas em azul de toluidina e os resultados foram registrados através de fotomicroscópio com sistema de captura de imagens. Verificou-se que os calos primários têm células maiores do que os embriogênicos, sendo que o tipo 1, com células de 39 a 48 μm de diâmetro, apresenta células parenquimáticas com paredes mais espessas (cerca de 3,1 μm), enquanto os do tipo 2 possuem células parenquimáticas alongadas (com 101 a 165 μm de diâmetro), espaços intercelulares mais amplos e 1,9 μm de espessura de parece celular. O calo embriogênico mostrou-se com regiões meristemáticas bem definidas, com células pequenas (de 15 a 25 μm de diâmetro), isodiamétricas, citoplasma denso e reduzido, paredes celulares mais estreitas (aproximadamente 0,9 μm), núcleo evidente e intensa divisão celular. A linearização das células em algumas regiões no calo embriogênico sugere a organização celular envolvida no processo de formação de embriões. Esta análise permitiu esclarecer anatomicamente as diferenças morfológicas entre os três tipos de calos.

The objective of the present work was to compare the anatomy of the type 1 primary callus (with no persistent growth), type 2 primary callus (with persistent growth), and embryogenic callus derived from Coffea arabica leaf explant, 'Catuaí Vermelho' cultivar. For this purpose the three types of calli were fixed in FAA solution (formalin, acetic acid, ethanol), dehydrated in an increasing ethanolic series, infiltrated by hystoresin and sectioned with the rotary microtome. The sections were stained with toluidine blue, and the results registered by a photomicroscope with image capture system. Cells from primary calli were bigger than embryogenic cells. The cells from type 1 primary calli present parenchymatic characteristics with thicker cell walls, while those from type 2 primary calli have bigger intercellular spaces. The embryogenic callus showed well defined regions with smaller isodiametric cells, with dense cytoplasm, prominent nuclei and intense cell division. The linear arrangement of embryogenic cells in some regions of the embryogenic calli may suggest the cell organization toward embryo regeneration. The present analysis has clarified the morphological differences between the three types of calli.