Micorrização de cafeeiros (Coffea arabica L.) sob cultivo orgânico avaliada por métodos fenotípicos e por PCR

Abstract

A micorrização tem efeito no crescimento e nutrição mineral do cafeeiro favorecendo seu desenvolvimento. Por isso é importante conhecer a comunidade de fungos micorrízicos arbusculares (FMAs) neste agrossistema, especialmente aqueles que estão colonizando as raízes do cafeeiro, visando conhecer o comportamento de fungos inoculados e autóctones em condições de campo. Técnicas moleculares, tais como a PCR, em conjunto com metodologias tradicionais baseadas em características fenotípicas dos fungos podem auxiliar no estudo da micorrização do cafeeiro. Assim, avaliou-se a ocorrência e a colonização de FMAs em cafeeiros a campo sob cultivo orgânico e inoculados com espécies selecionadas, através da caracterização morfológica e molecular dos esporos de FMAs, da avaliação dos fungos colonizantes por PCR e por cultura armadilha inoculada com raízes de cafeeiro provenientes do campo, e da determinação da taxa de colonização radicular. No solo rizosférico do cafeeiro a campo predominaram espécies da família Glomaceae e Acaulosporaceae. A maioria das espécies recuperadas do milho, inoculado com raízes do cafeeiro, pertencia às famílias Gigasporaceae e Glomaceae. Os iniciadores de amplificação de DNA específicos ACAU1660, GETU1, GETU2, GiITS1, GiITS2, VAACAU, VAGIGA e VANS1 não foram eficientes em detectar esses fungos nas raízes do cafeeiro. A inoculação aumentou a riqueza de espécies e densidade de esporos no cafeeiro. As espécies inoculadas, G. margarita e Gl. clarum, foram recuperadas na rizosfera do milho, comprovando sua colonização no cafeeiro, porém, não foram observados na rizosfera. Gigasporaceae foi detectada por PCR nas raízes. Apesar de ter detectado FMA pertencente à família Gigasporaceae, a técnica PCR não foi eficiente para estudar a ocorrência destes simbiontes nas raízes dos cafeeiros.

The arbuscular mycorrhizal has effect in the growth and mineral nutrition of coffee tree and that favors its development, and therefore the knowledge of arbuscular mycorrhizal fungi (AMF) community in coffee agrosystem become important. The traditional methodology and molecular techniques (such as the PCR) can aid in the study of the mycorrhization of coffee plants. Therefore, it was evaluated the occurrence and the colonization of AMF in a field under organic cultivation of coffee plants inoculated with selectioned species, using the morphologic and molecular characterization of AMF spores, evaluation of the colonization by PCR and by rate of mycorrhizal colonization. AMF inside of coffee plants roots were multiplied in a bioassay with maize. There was predominance of species of the Glomaceae and Acaulosporaceae families in the field rhizospheric soil. The most of the recovered AMF species of inoculated maize belonged to the Gigasporaceae and Glomaceae families. The specific primers for DNA amplification ACAU1660, GETU1, GETU2, GiITS1, GiITS2, VAACAU, VAGIGA e VANS1 were not efficient to detect AMF in coffee roots. The inoculation with AMF increased the fungal species and spores density in coffee rhizosphere. The inoculated species G. margarita and Gl. clarum were recovered by maize trapping culture inoculated with coffee tree roots, therefore indicating their presence in coffee. These species were not recovered in the rhizosphera of field soil planted with inoculated coffee plant. Gigasporaceae family was detected in coffee tree roots by PCR. Although PCR was able to detect some AMF this technique was not eficient to study the occurrence of symbionts colonizing coffee roots.