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Avaliação do efeito das concentrações de sacarose e dos estádios de desenvolvimento do fruto no cultivo in vitro de embriões de frutos de cafeeiro
(Universidade Federal de Viçosa, 2011-11) Jesus, Adriana Madeira Santos; Villa, Fabíola; Lara, Ana Carolina da Costa; Pasqual, Moacir
A cultura in vitro é uma técnica controlada que proporciona estudar os processos nutricionais, fisiológicos e bioquímicos de embriões em vários estádios de desenvolvimento. O objetivo foi avaliar a relação entre estádio de desenvolvimento do fruto e concentração de sacarose, no meio, durante o desenvolvimento, in vitro, de embriões de cafeeiro. Frutos de Coffea arabica cv. Acaiá foram colhidos, lavados, desinfestados, seus embriões excisados e inoculados em meio de cultivo MS, com pH ajustado para 5,8. Os tratamentos consistiram em combinação de concen- trações de sacarose (0, 15, 30, 60, 90 e 120 g L -1 ) e estádios de desenvolvimento do fruto (chumbinho, chumbo, verde, verde-cana, cereja e passa). Após a inoculação, os embriões foram incubados em sala de crescimento, a 27 ± 1 oC, fotoperíodo de 16 horas e 35 μ mol m -2 s -1 de intensidade luminosa. O delineamento experimental utilizado foi inteira- mente casualizado, em esquema fatorial 6 x 6, com seis repetições constituídas por quatro tubos cada. Após 60 dias de desenvolvimento, as plântulas foram avaliadas com base no comprimento da parte aérea, massa de matéria fresca total da parte aérea e das raízes. Observaram-se influências das concentrações de sacarose e dos estádios de desenvolvi- mento do fruto no crescimento e desenvolvimento das plântulas. Resultados satisfatórios para todas as variáveis estudadas foram obtidos com embriões excisados no estádio verde, inoculados em meio de cultivo suplementado com 51 a 70 g L -1 de sacarose.
Calli induction in leaf explants of coffee elite genotypes
(Universidade Federal de Santa Maria, 2011-03) Rezende, Juliana Costa de; Carvalho, Carlos Henrique Siqueira de; Pasqual, Moacir; Santos, Ana Carolina Ramia; Carvalho, Stephan Malfitano de
Three experiments were carried out with the objective of achieving high effectiveness in calli induction from high heterozygosis leaf explants of Coffea arabica through indirect somatic embryogenesis. A randomized-block design in a 2x5 factorial arrangement made up of two media [BOXTEL & BERTHOULY (1996) and TEIXEIRA et al. (2004)] and five C. arabica genotypes were used in the first experiment. In the second experiment the embryogenic calli production potential was evaluated in ten genotypes. Each of them was considered as a treatment. In the third experiment the variations in both 2.4-D (2.5 e 20μM) and 2-iP (2.5 e 20μM) concentrations in TEIXEIRA et al. (2004) medium and secondary media were evaluated. Crops were kept in a growth room under darkness, at 25±2 o C. The medium described by TEIXEIRA et al (2004) was found to be superior when compared to that described by BOXTEL & BERTHOULY (1996) in the 2.2 and 7.2 genotypes. An opposite behavior was noticed in 4.2 genotype, that is, BOXTEL & BERTHOULY (1996) had medium superiority. Both 3.0 and 5.0 genotypes had the same behavior in both media studied, which shows that the somatic embryo production depends on the genotype. Calli induction depends on the 2-iP and 2.4 D ratio. The 20.0μM of 2.4-D and 20.0μM of 2-iP combination caused the highest embryogenic calli induction rate.
Calogênese em anteras de cafeeiro 'Acaiá cerrado' utilizando 2,4D, cinetina e AIB
(2003) Araújo, José Sérgio de; Rezende, Juliana Costa de; Pereira, Alba Regina; Pereira, Bruno de Carvalho; Pasqual, Moacir; Consórcio Brasileiro de Pesquisa e Desenvolvimento do Café
Os meios nutritivos utilizados para a cultura de tecidos fornecem substâncias essenciais para o crescimento e controlam, em grande parte o padrão de desenvolvimento "in vitro". Objetivou-se induzir calos em anteras de cafeeiro mediante a utilização de diferentes concentrações 2,4-D (2,4 diclorofnoxiacético), Cinetina e AIB (Ácido Indolil Butírico) no meio de cultura. O experimento foi conduzido no Laboratório de Cultura de Tecidos da Universidade Federal de Lavras. Os tratamentos constituíram-se de diferentes concentrações de 2,4-D (0; 1; 2 e 4 mg.L- 1) x Cinetina (0; 2; 4 e 8 mg.L- 1) e 2,4 D (0; 0,5; 1 e 2 mg.L- 1) x AIB (0; 0,5; 1 e 2 mg.L-1) acrescido ao meio de cultura "IC". Observou-se a porcentagem de indução de calos e peso da matéria fresca dos calos. Houve interação significativa para 2,4-D e cinetina na indução de calos, enquanto, para peso da matéria fresca de calos somente houve efeito significativo dos fatores isolados. Sendo que o aumento da produção de calos ocorreu até a concentração de 2 mg.L -1 de 2,4-D, ponto a partir do qual, o regulador de crescimento passou a inibir a produção de calos. A melhor resposta para indução de calos foi promovida pela interação entre 2,4-D (2 mg.L -1 ) e cinetina (2 mg.L -1 ): Observou-se, acréscimo no peso da matéria fresca dos calos com adição de até 2 mg.L -1 de 2,4-D, o mesmo comportamento foi observado na concentração de até 4 mg.L -1 de cinetina, sendo que após essas respectivas concentrações houve um decréscimo no peso da matéria fresca do calo. Houve também interação significativa para 2,4-D e AIB para porcentagem de indução de calos e peso da matéria fresca de calos, sendo que, maiores porcentagens de indução de calos ocorreram com 2 mg.L -1 de AIB, na ausência de 2,4-D, com 1 mg.L -1 de 2,4-D combinado com a concentração de 1 mg.L -1 de AIB e com 2 mg.L -1 de 2,4-D, na ausência de AIB. Maior peso da matéria fresca de calos foi observado na interação entre 1 mg.L -1 de 2,4-D e 0,5 mg.L -1 de AIB. Diante dos resultados obtidos pode-se concluir que, a cultivar Acaiá Cerrado responde as diferentes concentrações dos reguladores de crescimento na indução de calos em anteras. Sendo que as combinações mais eficientes foram de 2 mg.L -1 de 2,4-D X 2 mg.L -1 de cinetina e 1 mg.L -1 de 2,4-D x 1 mg.L -1 de AIB.
Calogênese em anteras de cafeeiro Coffea arabica L.
(Universidade Federal de Lavras, 2004) Araújo, José Sérgio de; Pasqual, Moacir; Universidade Federal de Lavras
Objetivou-se com este trabalho, estudar a calogênese em anteras oriundas de uma população segregante F2 de Coffea arabica L. Na indução de calogênese, foi efetuada a assepsia dos botões florais com álcool 70% por 1’, hipoclorito de sódio 1,4% durante 15’. Em seguida, as anteras foram extraídas, inoculadas em meio "IC" (indução de calos) e mantidos em estufa tipo BOD, sob temperatura de 27 ±1°C. Para controlar a contaminação causada por fungos e bactérias, foram acrescidos ao meio 10 mg L-1 de benomyl e 50 mg L-1 de cloranfenicol após o meio ter sido autoclavado. Os meios de cultura tiveram o pH ajustado para 5,7 ±1 antes de serem autoclavados. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente causalizado, com 4 repetições e 30 anteras por placa. Experimento 1: meio IC suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mgL-1) e cetina (0, 2, 4 e 8 mgL-1). Experimento 2: meio IC suplementado de cinetina (0, 2, 4 e 8 mgL-1), ácido indol butírico (0; 0,5; 1 e 2 mgL-1) e 2 mgL-1 de 2,4-D. Experimento 3: meio IC suplementado de cinetina (0, 1, 2, 4 e 8 mgL-1), ácido giberélico (0; 2,5; 5; 10 e 20 mgL-1) e 8 mgL-1 de ácido naftalenoacético. Concluiu-se que a presença de fungicida e bactericida adicionados ao meio de cultura reduz consideravelmente a contaminação causada por microorganismos. A combinação entre 2,4-D e cinetina favorece a indução de calos primários. A combinação de concentrações de 8 mgL-1 cetina e AIB a 1 mgL-1 atua favoravelmente na indução de calos. Sugere-se que o GA3 tenha um efeito no aumento da rapidez de crescimento dos calos provenientes de anteras de cafeeiro.
Calogênese em anteras de cafeeiro Coffea arabica L.
(Universidade Federal de Lavras, 2004-01-30) Araújo, josé Sérgio de; Pasqual, Moacir
Objetivou-se com este trabalho, estudar a calogênese em anteras oriundas de uma população segregante F2 de Coffea arábica L. Na indução de calogênese, foi efetuada a assepsia dos botões florais com álcool 70 % por 1’, hipoclorito de sódio 1,4% durante 15’. Em seguida, as anteras foram extraídas, inoculadas em meio “IC” (indução de calos) e mantidas em estufa tipo BOD, sob temperatura de 27 +_ 1º C. Para controlar a contaminação causada por fungos e bactérias, foram acrescidos ao meio 10 mg L-1 de benomyl e 50 mg L -¹ de cloranfenicol após o meio ter sido autoclavado. Os meios de cultura tiveram o pH ajustado para 57+_ 1 antes de serem autoclavados. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com 4 repetições e 30 anteras por placa. Experimento 1: meio IC suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg L -¹) e cinetina (0, 2, 4 e 8 mg L -¹). Experimento 2: meio IC suplementado de cinetina (0, 2, 4 e 8 mg L -¹), ácido indol butírico (0; 0,5; 1 e 2 mg L -¹) e 2 mg L -¹ de 2,4-D. Experimento 3: meio IC suplemento de cinetina (0, 1, 2, 4 e 8 mg L -¹), ácido giberélico (0; 2,5, 5; 10 e 20 mg L -¹) e 8 mg L -¹ de ácido naftalenoacético. Conclui-se que a presença de fungicida e bactericida adicionado ao meio de cultura reduz consideravelmente a contaminação causada por microorganismos. A combinação entre 2,4-D e cinetina favorece a indução de calos primários. A combinação de concentrações de 8 mg L -¹ cinetina e AIB a 1 mg L -¹ atua favoravelmente na indução de calos. Sugere-se que a GA3 tenha um efeito no aumento da rapidez de crescimento dos calos provenientes de anteras de cafeeiro.
Calogênese em anteras de cafeeiro Coffea arabica L.
(Universidade Federal de Lavras, 2004-01-30) Araújo, Jose Sérgio de; Pasqual, Moacir
Objetivou-se com este trabalho, estudar a calogênese em anteras oriundas de uma população segregante F, de Coffea arabica L. Na indução de calogênese, foi efetuada a assepsia dos botões florais com álcool 70% por 1”, hipoclorito de sódio 1,4% durante 15º. Em seguida, as anteras foram extraídas, inoculadas em meio “IC” (indução de calos) e mantidas em estufa tipo BOD, sob temperatura de 27 + 1º €. Para controlar a contaminação causada por fungos e bactérias, foram acrescidos ao meio 10 mg L” de benomyl e 50 mg L' de cloranfenicol após o meio ter sido autoclavado. Os meios de cultura tiveram o pH ajustado para 5,7 + 1 antes de serem autoclavados. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, com 4 repetições e 30 anteras por placa. Experimento 1: meio IC suplementado de 2,4-D (0, 1,2 e 4 mg L'") e cinetina (0, 2, 4e 8 mg L'). Experimento 2: meio IC suplementado de cinetina (0, 2, 4e 8 mg L”"), ácido indol butírico (0;0,5;1e2 mg Le 2mgL' | ' de 2,4-D. Experimento 3: meio IC suplementado de cinetina (0, 1,2,4e $mg L', ácido giberélico (0; 2,5, 5; 10 e 20 mg L!) e 8 mg L'! de ácido naftalenoacético. Concluiu-se que a presença de fungicida e bactericida adicionado ao meio de cultura reduz consideravelmente a contaminação causada por microorganismos. A combinação entre 2,4-D e cinetina favorece a indução de calos primários. A combinação de concentrações de 8 mg L* cinetina e AIB a 1 mg L'! atua favoravelmente na indução de calos. Sugere-se que o Gás tenha um efeito no aumento da rapidez de crescimento dos calos provenientes de anteras de cafeeiro.
Calogênese in vitro em anteras de Coffea arabica L.
(Editora UFLA, 2004-07) Palú, Ednamar Gabriela; Silva, Adriano Bortolotti da; Pasqual, Moacir
O café é um dos mais importantes produtos do mercado internacional; porém, o tempo gasto e os recursos despendi- dos são fatores limitantes para o melhoramento do cafeeiro por meio de métodos convencionais. Contudo, a cultura de anteras surge como uma alternativa viável e de curto prazo para solução desses problemas. Com o presente trabalho, objetivou-se a produção de dihaplóides com a cultura de anteras do cafeeiro (androgênese indireta), buscando um protocolo para a fase de indução de calos. Para tanto, foi efetuada a assepsia dos botões florais e das anteras, que, em seguida, foram inoculadas em meio IC e mantidas no escuro por 8 semanas, sob temperatura de 25 o C ± 1. Para induzir a calogênese em anteras da cv. Acaiá Cerrado, foram testadas as concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1 ) x cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L -1 ) e 2,4-D (0; 0,5; 1 e 2 mg.L -1 ) x AIB (0; 0,5; 1 e 2 mg.L -1 ) mais 2iP (2 mg.L -1 ) e, para a cv. Rubi, as concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1 ) x cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L -1 ). Foi observado que a maior porcentagem de indução de calogênese em anteras na cv. Acaiá Cerrado ocorre com as combinações de 2,4-D (2 mg.L -1 ) + cinetina (1,9 mg.L -1 ) e 2,4-D (0,86 mg.L -1 ) + AIB (1 mg.L -1 )+ 2iP (2 mg.L -1 ); para cv. Rubi, a combinação de 2,4-D (1,9 mg.L -1 ) e cinetina (4 mg.L -1 ).
Concentrações de 2,4-D e cinetina na indução de calos em anteras de Coffea arabica
(Embrapa Café, 2009) Araujo, José Sérgio; Pasqual, Moacir
Os meios para a cultura de tecidos de plantas fornecem substâncias essenciais e controlam o padrão de desenvolvimento “in vitro”. Baseiam‐se nas exigências da planta, com algumas modificações para atender às necessidades específicas “in vitro”. Compostos são adicionados ao meio para suprirem as necessidades das células.
Cultura "in vitro" de embriões e segmentos nodais do cafeeiro (Coffea arabica L.)
(Universidade Federal de Lavras, 2001) Ribeiro, Lílian de Sousa; Pasqual, Moacir; Universidade Federal de Lavras
O presente trabalho teve como objetivo avaliar o desenvolvimento in vitro de embriões imaturos e segmentos nodais de Coffea arabica L. Tanto para embriões do cultivar Acaiá Cerrado MG 1474, como para segmentos nodais do cultivar Rubi foram testadas duas fontes de nitrogênio (KNO3 e NH4NO3) nas seguintes concentrações do meio MS de cultura: 0, 25, 50, 75, 100%. O desenvolvimento de segmentos nodais de Coffea arabica L. cultivares Caturra Amarelo, Acaiá, Rubi e Catuaí, foi estudado em 4 meios de cultura (MS, WPM, White e Knudson). Estudou-se também o desenvolvimento de embriões de Coffea arabica L. cultivares Rubi, Topázio, Icatú e Acaiá inoculados em 4 meios de cultura (MS, WPM, White e Knudson). Para todos os experimentos os meios básicos de cultura tiveram seus pHs ajustados para 5,8 antes de serem autoclavados a 121oC e 1,1 atm por 20 minutos, e foram solidificados com 7,0 g.L-1 de ágar. Os experimentos foram montados em câmara de fluxo laminar e mantidos em sala de crescimento com temperatura de 25 +ou- 1oC e fotoperíodo de 16 horas sob 35 µM.m-2.s.-1 de intensidade luminosa. Na cultura de embriões de C. arabica L. a concentração de Nitrato de Amônio do meio MS pode ser reduzida em até 50%. A utilização de Nitrato de Potássio resultou num melhor desenvolvimento da parte aérea e do sistema radicular quando comparado ao meio sem de KNO3. Embriões de Coffea arabica L. cultivares Rubi e Acaiá, se desenvolveram melhor quando colocados nos meios básicos de cultura MS e Knudson. O meio básico de cultura WPM é o mais eficiente para a cultura de segmentos nodais de explantes de Coffea arabica L. Segmentos nodais das cultivares Caturra e Rubi apresentam melhor comportamento in vitro, quando comparados com as demais cultivares.
Desenvolvimento de embriões e plântulas de Coffea arabica L. oriundas de embriogênese somática direta
(Universidade Federal de Lavras, 2015-10-19) Rezende, Juliana Costa de; Pasqual, Moacir
O melhoramento genético do cafeeiro tem incorporado por meio de cruzamentos, ganhos genéticos para produtividade e outras características de interesse agronômico. A introdução de métodos biotecnológicos para auxiliar os programas de melhoramento genético tem se mostrado bastante útil, principalmente em culturas perenes, como é o caso do cafeeiro. Um importante método de propagação in vitro de plantas de Coffea é a embriogênese somática. Diante dos fatos, objetivou-se, com este trabalho, desenvolver embriões e plântulas de Coffea arabica L. cv. Rubi provenientes de embriogênese somática direta. No desenvolvimento de embriões somáticos, avaliou-se a influência de NH 4 NO 3 (0%; 25%; 50%; 75 e 100%) x KNO 3 (0%; 25%; 50%; 75% e 100%) e a influência de sacarose (0; 15; 30; 45 e 60mg.L -1 ) x GA 3 (0; 2,5; 5 e 10mg.L -1 ). No desenvolvimento de plântulas, avaliou-se a influência de diferentes tipos de meio (MS; Knudson; WPM; White) x ágar (0; 2; 4; 6 e 8g L -1 ) e a influência de GA 3 (0; 2,5; 5; 10mg L - 1) x ANA (0; 0,25; 0,5; 1; 2mg L - 1). Os experimentos foram conduzidos em sala de crescimento com irradiância em torno de 32 Mol.m -2 .s -1 e fotoperíodo de 16 horas, com temperatura de 25 ± 1 o C. As variáveis avaliadas foram: número de folhas, comprimento da parte aérea e massa fresca da parte aérea. Na etapa de aclimatização de plântulas, foram testados dois tipos de substrato (Plantmax ® e Plantmax ® mais casca de arroz carbonizada (50%)) x fertilizante de liberação lenta (0, 0,5, 1 e 2g do fertilizante por célula). Os resultados indicaram que é possível a obtenção de plântulas micropropagadas de Coffea arabica L. cultivar Rubi via embriogênese somática direta. Para o desenvolvimento de embriões somáticos, a utilização de 50% de NH 4 NO 3 e KNO 3 é eficiente na indução de folhas. A ausência destes sais proporcionou o melhor peso e a utilização de 6mg.L -1 de GA 3 proporcionou melhor desenvolvimento no comprimento da parte aérea. Para o desenvolvimento de plântulas de cafeeiro, o meio WPM, a utilização de 10mg.L - 1 de GA 3 e 1mg.L -1 de ANA apresentaram maior eficiência. A concentração de 1,5mg.L -1 de ágar proporcionou maior número de folhas e comprimento da parte aérea. O maior peso foi obtido na ausência de ágar.
Development of Coffea arabica L. seedling obtained from direct somatic embryogenesis
(Editora UFLA, 2008-01) Rezende, Juliana Costa de; Ferreira, Ester Alice; Pasqual, Moacir; Villa, Fabíola; Botelho, César Elias; Carvalho, Samuel Pereira de
This work aimed to develop embryos and acclimatize seedlings of Coffea arabica L. cv. Rubi produced by direct somatic embryogenesis. For the development of somatic embryos, were evaluated the effect of sucrose (0; 15; 30; 45 and 60 g.L-1) and GA3 (0; 2.5; 5 and 10 mg.L-1). For the development of seedlings, were evaluated the influence of GA3 (0; 2.5; 5; 10 mg.L-1) and NAA (0; 0.25; 0.5; 1; 2 mg L-1). The in vitro experiments were carried out in a growth chamber under light intensity of 32 μMol.m-2.s-1, at the temperature of ± 25 1oC and photoperiod of 16 hours. The parameters evaluated were: number of leaves, length of the aerial part and fresh weight of the seedlings. For the seedling acclimatization process two types of substrates were tested (Plantmax® and Plantmax® plus carbonized rice peels (v/v 1:1) and fertilizer with slow-release (Osmocote®) (0, 0.5, 1 and 2 g of the fertilizer per cell). The results indicated that 5.81 mg L-1 GA3 was efficient for the development of coffee somatic embryos and GA3 (10 mg. L-1) in combination with 1mg. L-1 NAA showed efficiency in the development of the seedlings obtained by direct somatic embryogenesis. The best substrate for acclimatization was Plantmax® mixed with carbonized rice peels and 1.68 g per cell of the Osmocote® fertilizer.
Efeitos de diferentes concentrações de BAP e dos meios básicos MS e WPM na proliferação e desenvolvimento de brotos axilares de Coffea arabica "in vitro"
(2003) Jesus, Adriana Madeira Santos; Carvalho, Samuel Pereira de; Pasqual, Moacir; Carvalho, Michelly; Corrêa, Luiza Vasconcelos Tavares; Consórcio Brasileiro de Pesquisa e Desenvolvimento do Café
A inexistência de metodologia para a multiplicação assexuada de C. arabica em escala comercial tem sido a maior restrição ao emprego da propagação vegetativa como estratégia para o uso de híbridos de café obtidos pelo melhoramento genético. A micropropagação tem possibilitado a multiplicação em grande escala, em outras espécies, dos genótipos selecionados, disponibilizando-os de forma mais rápida aos agricultores. O sucesso na micropropagação está diretamente relacionado com os componentes utilizados no meio de cultura, sendo que o uso de reguladores de crescimento é considerado fator preponderante. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de diferentes concentrações de BAP nos meios de cultura básicos MS e WPM na micropropagação de segmentos nodais de coffea arabica Cvs Rubi, Catuaí e Icatu. Segmentos nodais provenientes de cultivos preestabelecidos "in vitro", com uma gema, foram inoculados em meio de cultivo básico MS e WPM, acrescidos de BAP nas concentrações 0, 6, 9, 12 e 15 mg L -1 . Ajustou-se o meio para o pH 5,8 e solidificou-se com ágar 0,7%. Após a inoculação, os explantes foram transferidos para sala de crescimento com temperatura 27 o C ± 1, fotoperíodo de 16h e intensidade luminosa de 32 µmol.m -2 s -1 . Após 90 dias, avaliou-se o número total de brotações (NTB), peso da matéria fresca (PMF), número de brotos > 1cm (NB>1cm), comprimento médio de brotações (CMB). Os resultados para os meios básicos MS e WPM foram respectivamente os seguintes: Para ‘Rubi’ NTB (4,275a e 4,64a); PMF (0,30a e o,33a );NB >1 cm (1,32a 1,15b )e CMB (0.485b e 0,69a),assim o meio básico WPM propiciou os melhores resultados para NB >1 cm e CMB não diferindo estatísticamente do MS para NTB e PMF. Para o ‘Icatu’: NTB (3,28a e 3.487a); PMF (0,3474a e 0,225b);NB >1 cm (1.38b e 1,06b)e CMB (0,7053a e 0,4525b),ou seja o meio MS foi melhor, não diferindo do WPM apenas para NTB. O ‘Catuaí’ apresentou melhor resultado para PMF no meio MS e para o NBT no WPM, não diferindo nas outras duas variáveis ; NTB (3,70b e 4,90a); PMF (0,36a e 0.32b);NB >1 cm (1.25a e 1,21a) e CMB (0,63a e 0,562a). As diferenças estatísticas foram detectadas pelo teste de Scott-knott a 5%..A adição de BAP ao meio básico MS teve efeito significativo para todas as variáveis analisadas sendo a melhor dosagem a de 15mgL -1. Para o meio básico WPM houve efeito significativo para a variável NTB, com a melhor dosagem de 12mg L -1 .
Efeitos de fitorreguladores, antioxidante e defensivos na propagação vegetativa "in vivo" e "in vitro" de Coffea arabica L.
(Universidade Federal de Lavras, 1996) Rezende, Rinaldo Andrade; Pasqual, Moacir; Universidade Federal de Lavras
O presente trabalho teve como objetivos avaliar os efeitos de ácido indolbutírico (AIB) e do antioxidante polivinilpirrolidone (PVP40) sobre a propagação vegetativa "in vivo"; benzilaminopurina (BAP), Benomyl e Triadimenol na propagação vegetativa "in vitro'' e ácido indolbutírico (AIB) sobre o enraizamento de brotaçõs produzidas "in vitro", durante a fase de aclimatização, em cafeeiro (Coffea arabica L.). Os experimentos foram realizados em casa-de-vegetação e no laboratório de cultura de tecidos do Departamento de Agricultura (DAG) da Universidade Federal de Lavras - UFLA. No experimento 1 utilizou-se o delineamento "inteiramente casualizado" em esquema fatorial 4 x 4 + 1, com 4 repetições e 10 estacas/parcela.Os tratamentos constituiram-se de PVP40 (O, 500,1000 e 2000 mg/l), tempo de imersão (6,12,24 e 48 horas). A seguir foram imersos em AIB (100 mgll), tempo de imersão (12 horas); Benlate (Benomyl), imersáo rápida (0,1%, 2 minutos); testemunha seca. Nos experimentos 2 e 3 (Propagação vegetativa "in vitro") utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado e delineamento em blocos casualizados respectivamente, em esquema fatorial, com os seguintes tratamentos; experimento 2: concentrações de BAP (O, 3, 6 e 9mg/L) e Concentrações de Benomyl (O, 100, 200, 300 e 400mg/L) num fatorial 4x5, com 5 repetições 3 explantes/frasco; experimento 3: concentrações de BAP (O, 3, 6 e 9mglL) x concentrações de Triadimenol (O, 100, 200 e 400mg/L), num fatorial 4x4, com 4 repetições e 1 explante/tubo. No experimento 4 os tratamentos constituíram-se de diferentes concentrações de AIB (O, 10, 20 e 40mg/L), nas quais as bases das brotações foram imersas por diferentes períodos de tempo (O, 12 e 24 horas). O 4 repetições e 3 plantas por parcela. As avaliações foram feitas 120 dias após a instalação dos experimentos, avaliando-se para cada experimento algumas das seguintes características: enraizamento de estacas, número de folhas, comprimento de brotos, comprimento de raizes, número total de brotações, número de brotações iguais ou maiores a 1cm, peso da matéria fresca e seca da parte aérea, peso da matéria fresca e seca do sistema radicular. Pelos resultados obtidos pode-se concluir que: o antioxidante PVP40 foi melhor na dosagem 330 mg/l durante 6 horas para a cultivar Mundo Novo (LCP - 379/19), apresentando um percentual de enraizamento de 68%; o BAP foi melhor a 9 mg/L na ausência de Benomyl e Triadimenol tendo este demonstrado efeito negativo para a cv. Catuaí 2077-2-5-44; a melhor concentraç40 foi 40 mg/L de AIB por 24 horas para o crescimento das plantas, não alterando a matéria fresca da parte aérea e do sistema radicular para a cv. Catuaí 2077-2-5-44.
Embriogênese somática direta em foliares de Coffea arabica L. cv. acaiá cerrado: efeito de cinetina e ácido giberélico
(Editora UFLA, 2007-03) Pereira, Alba Regina; Carvalho, Samuel Pereira de; Pasqual, Moacir; Santos, Flávia Carvalho
Objetivou-se estudar o efeito da cinetina, GA 3 e ANA na indução in vitro de embriões somáticos de cafeeiro pela via direta. Segmentos foliares retirados de plântulas cultivadas in vitro foram inoculados em meio de cultura MS com 50% dos sais contendo as seguintes combinações de cinetina (0; 1; 2; 4 e 8 mg L -1 ) e GA 3 (0; 2,5; 5; 10 e 20 mg L -1 ). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,8 ± 1 antes de serem autoclavados. O experimento foi mantido em sala de crescimento a 25 ± 1°C. Avaliou-se número total de embriões somáticos, o número de embriões cotiledonares, o número de embriões torpedo e a média dos comprimentos dos embriões. A ação combinada entre cinetina, GA 3 e ANA estimulou a indução de embriões somáticos pela via direta. O maior comprimento de embriões foi observado quando se utilizou 8 mg L -1 de cinetina e 8,0 mg L -1 de ANA ou 17 mg L -1 de GA 3 e 8,0 mg L -1 de ANA isoladamente.
EMBRIOGÊNESE SOMATICA INDIRETA EM CLONES ELITE DE Coffea arabica : MULTIPLICAÇÃO DE CALOS
(2009) Rezende, Juliana Costa de; Carvalho, Carlos Henrique Siqueira de; Santos, Ana Carolina Ramia; Teixeira, João Batista; Pasqual, Moacir; Embrapa - Café
Objetivou-se comparar a taxa de multiplicação de calos embriogênicos de dois clones de Coffea arabica, selecionados para resistência à ferrugem e de alta produtividade, em dois meios de cultura, nos sistemas de cultivo gelificado e líquido. O experimento foi conduzido no Laboratório de Cultura de Tecidos da Fundação Procafé, em Varginha, MG. Os calos foram induzidos a partir de explantes foliares em meio nos meios PM/SM conforme protocolo descrito por Teixeira et al., (2004) e para a multiplicação, foram testados dois meios de cultura (meio do estágio dois de Albarran et al., 2004 e meio de multiplicação de Teixeira et al., 2004) e dois sistemas de cultivo (gelificado e líquido). O delineamento experimental utilizado foi inteiramente casualizado, em esquema fatorial 2 x 2, com 5 repetições por tratamento. As avaliações foram realizadas aos 21, 42 e 63 dias após a instalação do experimento, por meio da pesagem dos calos. Verificou-se que o potencial de multiplicação de calos embriogênicos é influenciado pelo genótipo e meio de cultura e que o sistema gelificado apresentou maior eficiência na multiplicação de calos embriogênicos dos clones estudados quando comparado ao sistema líquido.
Embriogênese somática indireta em clones elite de Coffea arabica L.
(Universidade Federal de Lavras, 2008-08-29) Rezende, Juliana Costa de; Pasqual, Moacir
Este trabalho foi conduzido visando alcançar alta eficiência na embriogênese somática indireta em explantes foliares de plantas matrizes de Coffea arabica. Na indução de embriões somáticos, avaliou-se o potencial de produção de calos embriogênicos de clones elites em diferentes meios de cultura e variações nas concentrações de 2,4-D e 2-iP, nos meios primário e secundário de Teixeira et al. (2004 ). Na fase de multiplicação de calos, os tratamentos constituíram-se de dois meios de cultura (meio do estágio dois de Albarran et al., 2004 e meio de multiplicação de Teixeira et al., 2004) e dois sistemas de cultivo (gelificado e líquido). As avaliações foram realizadas aos 21, 42 e 63 dias após a instalação do experimento, por meio da pesagem dos calos. Na conversão de embriões somáticos em estádio cotiledonar para plântulas, avaliou-se o efeito do IBA e do BAP no meio de crescimento (PRM) de Teixeira et al. (2004). Plantas produzidas via embriogênese somática foram comparadas, em condições de campo, com plantas provenientes de sementes. Observou-se que a produção de embriões somáticos é fortemente dependente do genótipo. A indução de calos depende da época de coleta dos explantes e da relação de 2-iP e 2,4-D. O sistema gelificado apresentou maior eficiência na multiplicação de calos embriogênicos dos clones estudados. Considerando a porcentagem plântulas normais e plântulas com raízes e os valores médios do comprimento da parte aérea, não há necessidade da adição de IBA e BAP, no protocolo empregado, para a conversão de embriões somáticos em estádio cotiledonar para plântulas. As plantas provenientes de embriogênese somática apresentaram maior diâmetro de copa em relação às plantas provenientes de sementes, não havendo diferença significativa para as demais características avaliadas. Não foi detectada, pela inspeção visual, qualquer alteração no fenótipo na plantas provenientes da embriogênese somática. Assim, o comportamento de plântulas de Coffea arabica produzidas via embriogênese somática é semelhante ao de plântulas oriundas de sementes.
Embriogênese somática indireta em explantes foliares de Coffea arabica L. cv. Obatã
(Editora UFLA, 2003-01) Maciel, Anna Lygia de Rezende; Pasqual, Moacir; Pereira, Alba Regina; Rezende, Juliana Costa de; Silva, Adriano Bortolotti da; Dutra, Leonardo Ferreira
Objetivou-se, com este trabalho, estudar a embriogênese somática indireta em Coffea arabica L. cv. Obatã, incluindo as etapas de indução de calos, diferenciação, regeneração e formação de embriões. Segmentos foliares retirados de plantas em condições de campo foram desinfestados com álcool 70% por 1 e hipoclorito de sódio 1% durante 15 e inoculados em meio IC (indução de calos) suplementado de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1) e Cinetina (0, 2, 4 e 8 mg.L -1). Posteriormente, os calos foram transferidos para o meio DC (diferenciação de calos), adicionado de diferentes concentrações de 2,4-D (0, 1, 2 e 4 mg.L -1) e BAP (0, 2, 4 e 8 mg.L -1); em seguida, durante a etapa de regeneração, os calos embriogênicos friáveis foram inoculados em meio R suplementado de BAP (0, 2, 4 e 6 mg.L -1 ) e sacarose (0, 15, 30, 45 e 60 g.L -1). Os meios de cultura utilizados tiveram pH ajustado para 5,6 1 antes de serem autoclavados. Os experimentos foram mantidos em sala de crescimento a 26 1 0 C. Durante as etapas de indução e diferenciação de calos, os experimentos ficaram em condições de obscuridade, e na etapa de regeneração, os experimentos foram mantidos sob fotoperíodo de 16 horas e intensidade luminosa de 35 mol.m -2 .s -1 . Concluiu-se que a combinação entre 4 mg.L -1 de 2,4-D e 2 mg.L -1 de cinetina favoreceu a indução de calos primá- rios mistos. Maior freqüência de calos embriogênicos friáveis ocorreu na presença de BAP (8 mg.L -1), associado ou não ao 2,4-D, e maior número de embriões por explante foram obtidos quando utilizou-se sacarose (30 g.L -1 ) e BAP (3 mg.L -1).
Enraizamento de estacas de Coffea arabica L. cv. "Mundo Novo" imersas por diferentes períodos em soluções com várias concentrações de ácido indol-butírico
(2000) Pereira, André Barretto; Pasqual, Moacir; Ribeiro, Lílian de Sousa; Mendes, Antônio Nazareno Guimarães; Resende, Erivelton; Maciel, Anna Lygia de Rezende; Dias, Fábio Pereira; Consórcio Brasileiro de Pesquisa e Desenvolvimento do Café
Uma alternativa para a propagação de híbridos de Coffea arabica L. em escala comercial é a propagação vegetativa via enraizamento de estacas. Objetivou-se verificar o efeito do tempo de imersão em solução de ácido indol-butírico (AIB), no enraizamento de estacas de C. arabica L. cv. "Mundo Novo". Estacas herbáceas, oriundas de ramos ortotrópicos, constituídas de um nó, um par de folhas reduzidas a 1/3 de seu tamanho e 8-10 cm de comprimento, foram imersas em solução contendo AIB (0, 250, 500, 750 e 1000 mg.L-1) em diferentes tempos (5 segundos, 3, 6, 9 e 12 horas). O delineamento foi em blocos casualizados, com 3 repetições e 6 estacas por parcela. Foram utilizados modelos de superfície de resposta, através dos quais pode-se determinar as concentrações ideais para percentagem de estacas vivas, percentagem de estacas enraizadas e peso da matéria seca das raízes. O AIB como promotor de enraizamento não se mostrou eficiente e, portanto, seu emprego não é recomendável para estacas de C. arabica L.
Enraizamento de estacas de Coffea arabica L. cv. Mundo Novo imersas por diferentes períodos em soluções com várias concentrações de ácido naftaleno acético
(2000) Pereira, André Barretto; Pasqual, Moacir; Ribeiro, Lílian de Sousa; Maciel, Anna Lygia de Rezende; Mendes, Antônio Nazareno Guimarães; Resende, Erivelton; Dias, Fábio Pereira; Consórcio Brasileiro de Pesquisa e Desenvolvimento do Café
Uma alternativa para a propagação de híbridos de Coffea arabica L. em escala comercial é a propagação vegetativa via enraizamento de estacas. Objetivou-se verificar o efeito do tempo de imersão em solução de ácido naftaleno acético (ANA), no enraizamento de estacas de C. arabica cv. "Mundo Novo". Estacas herbáceas, oriundas de ramos ortotrópicos, constituídas de um nó, um par de folhas reduzidas a 1/3 de seu tamanho e 8-10 cm de comprimento, foram imersas em solução contendo ANA (0, 250, 500, 750 e 1000 mg.L-1) em diferentes tempos (5 segundos, 3, 6, 9 e 12 horas). O delineamento foi em blocos casualizados, com 3 repetições e 6 estacas por parcela. Foram utilizados modelos de superfície de resposta, através dos quais se determinaram as concentrações ideais para percentagem de estacas vivas, percentagem de estacas enraizadas e peso da matéria seca das raízes. Os melhores resultados para o enraizamento de estacas de C. arabica L. cv. "Mundo Novo", foram obtidos com a imersão da base da estaca em solução com 650 mg.L-1 de ANA por 6 horas.
Enraizamento de estacas de Coffea arabica L. em estufim
(2001) Pereira, André Barretto; Aguilar, Marco Antonio Galeas; Sodré, George Andrade; Pasqual, Moacir; Mendes, Antônio Nazareno Guimarães; Consórcio Brasileiro de Pesquisa e Desenvolvimento do Café
A propagação vegetativa através do enraizamento de estacas é uma alternativa viável para a multiplicação de híbridos de café em escala comercial. Neste trabalho, buscou-se substituir o uso de estufas com sistemas automáticos de nebulização, para produção de mudas por estaquia de Coffea arabica L. O experimento foi instalado num estufim plástico de 1,5 x 1 x 0,90 m, com leito de areia. Posteriormente, as estacas foram transferidas para um viveiro comum. Foram utilizadas estacas herbáceas, oriundas de brotações de ramos ortotrópicos, que, depois de preparadas, eram constituídas de um nó, um par de folhas reduzidas a um terço do seu tamanho, 8-10 cm de comprimento, e foram submetidas aos tratamentos: plantio direto no viveiro e no estufim. Variou-se o tempo de permanência das estacas no estufim (7, 14, 21, 28, 35, 42, 49 e 56 dias), utilizando-se um delineamento em blocos casualizados. Após 150 dias, avaliaram-se as seguintes características: percentagem de estacas vivas, número de brotações, comprimento de brotações, peso da matéria seca de brotações, percentagem de estacas enraizadas, número de raízes e peso da matéria seca das raízes. A utilização de estufim para enraizamento de estacas de C. arabica L. é uma alternativa tecnicamente viável. O período de 35 dias mostrou-se ideal para permanência das estacas no estufim.